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您的當(dāng)前位置:首頁(yè)大腸桿菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

大腸桿菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

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國(guó)標(biāo)法測(cè)定大腸桿菌樣本的細(xì)菌總數(shù)

實(shí)驗(yàn)?zāi)康?p>實(shí)驗(yàn)原理:國(guó)標(biāo)法操作的原理

實(shí)驗(yàn)器材:

培養(yǎng)箱,10只移液管,1只250ml錐形瓶,5只大試管,試管架,4個(gè)平皿,500ml大燒杯1個(gè),電子天平,紗布,脫脂棉,滅菌鍋,PH計(jì)或PH試紙,100ml量筒,橡皮手套,超凈臺(tái) 實(shí)驗(yàn)藥品: 磷酸鹽緩沖液,蒸餾水,LB培養(yǎng)基,瓊脂,5%NaOH,5%HCl 實(shí)驗(yàn)步驟: 一:

10只移液管,1只250ml錐形瓶,5只大試管,4個(gè)平皿,500ml大燒杯1個(gè),100ml量筒進(jìn)行洗滌,然后一起放入高壓蒸汽滅菌鍋中在121攝氏度條件下滅菌20min。滅完菌后烘干,完成后放入超凈臺(tái)中。

用酒精擦拭超凈臺(tái),紫外消毒30min 二:

1:用電子天平稱(chēng)取成品LB3.1241g和瓊脂1.8756g放入250ml的潔凈錐形瓶中。 2:用量筒量取125ml的蒸餾水加入該錐形瓶中,制成培養(yǎng)基。 3:用棉花堵住該錐形瓶的瓶口,用牛皮紙包住瓶口,用橡皮筋扎牢,再將培養(yǎng)基放入滅菌鍋中在121攝氏度之下滅菌20min。 4:滅完菌后放入超凈臺(tái)中備用。 三:

1:取1只無(wú)菌250ml錐形瓶,用量筒向其中加入49mlPBS 2:將1ml樣品加入到該錐形瓶中,搖勻制成1:50的細(xì)菌溶液。 3:取4只試管,編號(hào)1—4 4:用無(wú)菌移液管分別向4只試管中加入9ml的PBS 5:用1ml無(wú)菌移液管從樣品中移取1ml菌液加入到1中.震蕩試管使菌液均勻。 6:用1ml無(wú)菌移液管從1號(hào)試管中移取1ml的細(xì)菌溶液加入2號(hào)試管中,搖勻 7:用另一只1ml無(wú)菌移液管從2號(hào)試管中移取1ml細(xì)菌溶液,加入3中,搖勻......以此類(lèi)推直至4只試管中均加入了細(xì)菌溶液。 9:取4只平皿,編號(hào)1—4 10:分別用4只無(wú)菌移液管從這4只試管中移取1ml的菌液置于4只平皿中,加入45—50攝氏度溫度下的培養(yǎng)基,約15mm厚度。緩慢旋轉(zhuǎn)平皿使菌液與培養(yǎng)基混合均勻;待培養(yǎng)基冷凝后倒置。

11:將培養(yǎng)基在36攝氏度條件下培養(yǎng)12小時(shí)。

12:取出培養(yǎng)皿,選擇細(xì)菌個(gè)數(shù)在30至300個(gè)之間的平皿數(shù)細(xì)菌的個(gè)數(shù)。 四:實(shí)驗(yàn)結(jié)果(記得在操作過(guò)程和得到結(jié)果時(shí)拍照) 1號(hào),2號(hào)菌落個(gè)數(shù)多不可計(jì),舍棄 4號(hào)平皿中菌落數(shù)目小于10cfu,舍棄

3號(hào)平皿中菌落分布較均勻,數(shù)3號(hào)中的菌落數(shù),一共有210個(gè)cfu。 計(jì)算樣品中細(xì)菌濃度為:1.05×105Cfu/ml

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點(diǎn)評(píng)

超凈臺(tái)中的實(shí)驗(yàn)步驟講述詳細(xì),明確,不錯(cuò)。前面的步驟敘述有點(diǎn)亂,建議按照如下標(biāo)題重新調(diào)整順序。 實(shí)驗(yàn)步驟: 1、 儀器清洗

將燒杯,培養(yǎng)皿、試管等儀器用洗衣粉清洗,超聲5min.然后用清水清洗,超聲5min,最后用三蒸水清洗,放入烘箱中烘干。 2、 培養(yǎng)基配制

精確稱(chēng)量。。。。。。。。。。放入錐形瓶中,加入。。。。mL蒸餾水,搖勻 3,滅菌

包扎、滅菌,烘干備用

3、 超凈臺(tái)中的操作(如上) 除了實(shí)驗(yàn)步驟和結(jié)果,還要有討論和注意事項(xiàng) 例如:實(shí)驗(yàn)討論: 1、評(píng)價(jià)該方法(操作簡(jiǎn)易程度,靈敏度如何,適用性) 2、為何選擇細(xì)菌個(gè)數(shù)在30至300個(gè)之間的平皿數(shù)細(xì)菌的個(gè)數(shù)? 注意事項(xiàng) 比如各種儀器的使用注意事項(xiàng),以及保持潔凈,防止染菌等。

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