第２６卷第４期?。病。埃啊。赌辏保苍隆『印∧稀×謽I(yè)科　技?。郑希保玻叮危铮础。模澹悖病。埃啊。丁。剩铮酰颍睿幔臁。铮妗。龋澹睿幔睢。疲铮颍澹螅簦颍。樱悖椋澹睿悖濉。幔睿洹。裕澹悖瑁睿铮欤铮纾o瓊脂培養(yǎng)誘導非洲菊無菌生根研究　干曉紅‘　，譚嘵風　，胡芳　‘?。ǎ保小×謽I(yè)科技大學經(jīng)濟林育種與栽培國家林業(yè)局重點實驗室；?。玻怼×謽I(yè)科技大學環(huán)境藝術設計學院?！￠L沙４１０００４）　摘要：培養(yǎng)成本高，移栽成活率較低一直是植物組織培養(yǎng)中的兩大難題　為降低組織培養(yǎng)中瓊脂培養(yǎng)的成本，　提高移栽成活率，需尋求一種廉價而操作簡便的基質(zhì)取代瓊脂。以非洲菊的無菌芽為試材，分別接種在以砂礫　海綿　瓊脂為支撐材料的培養(yǎng)基中誘導生根，并統(tǒng)計移栽成活率。結果顯示，以砂礫為支撐基質(zhì)誘導非洲菊生　根快，且生根率高（分別為９６．５５％　８９．４７％、９４．１ｌ％）．幼苗長勢最好，移栽成活率最高（分別為９７．６３％?。梗叮玻担ァ。罚福保福ィ锿瑫r，營養(yǎng)液體積及支撐材料處理等細節(jié)技術對生根也有影響。說明砂礫與海綿等無機基　質(zhì)可以取代瓊脂作組織培養(yǎng)的支撐物，該技術將具有較強的推廣價值?！￡P鍵詞：非洲菊；無瓊脂培養(yǎng)；砂礫；無菌生根；移栽　中圖分類號：￥６８２．１　１　文獻標識碼：Ａ　文章編號：１００３—２６３０（２００６）０４—０００４—０２?。樱簦酰洌。铮睢。簦瑁濉。遥铮铮簦椋睿纭。铮妗。牵澹颍猓澹颍幔辏幔恚澹螅铮睿＃椋睢。郑椋簦颍铩。椋睢。恚澹洌椋帷。鳎椋簦瑁铮酰簟。粒纾幔颉。粒猓螅簦颍幔悖簦海裕瑁澹颍濉。幔颍濉。簦鳎铩。簦铮酰纾琛。穑颍铮猓欤澹恚蟆。椋睢。簦椋螅螅酰濉。悖酰欤簦酰颍濉。铮妗。穑欤睿簦幔螅希睿濉。椋蟆。瑁椋纾琛。悖铮螅?，ａｎｏｔｈｅｒ?。椋蟆。欤铮鳌。螅酰颍觯椋觯幔臁。颍幔簦濉。铮妗。瑁濉。簦簦颍幔睿螅穑欤幔睿簦桑睢。铮颍洌澹颉。簦铩。颍澹洌酰悖濉。簦瑁濉。悖铮螅簟。睢。椋簦椋螅螅酰濉。悖酰欤簦酰颍濉。鳎椋簦琛。幔纾幔?，ａｎｄ　ｔｏ?。椋睿悖颍澹幔螅濉。瑁濉。螅酰颍觯椋簦觯幔臁。颍幔簦濉。铮妫簦瑁澹簦颍幔睿螅穑欤睿簦幔幔睿铮簦瑁澹颍耄椋睿洹。铮妫螅酰穑穑铮颍簦椋睢。悖酰椋簦颍澹恚澹洌椋酰幔椋睿螅簦澹幔洹。铮妫幔纾幔颍椋螅睿澹澹洌澹?，ｗｈｉｃｈｉｓ?。悖瑁澹幔穑幔睿洹。茫幔睢。猓濉。鳎幔螅瑁澹洹。洌铮鳎睢。澹幔螅椋欤鳎濉。颍澹螅穑澹悖簦椋觯澹欤。穑酰簟。簦瑁濉。猓酰洌蟆。铮妗。牵澹颍猓澹颍帷。辏幔恚澹螅铮睿椋椤。椋睢。恚澹洌椋幔ǎ停樱拢粒保担恚纾蹋。桑拢粒埃玻恚纾蹋?。）ｗｉｔｈ　ｔｈｒｅｅ?。耄椋睿洌蟆。铮妗。螅酰穑穑铮颍簟。椋睢。觯椋簦颍铩。簦铩。椋睿洌酰悖濉。簦铩。颍铮铮?，ｗｈｉｃｈ?。颍濉。幔纾颍椋?，ｓｐｏｎｇｅ，ａｎｄ?。幔纾幔颍粒睿洹。簦瑁澹睢。鳎濉。簦颍幔睿螅穑欤睿簦澹洹。簦瑁濉。欤椋幔簦簦欤濉。颍铮铮簦澹洹。猓酰洌蟆。妫颍铮恚簦瑁濉。猓铮簦簦欤濉。簦铩。瑁濉。猓澹洌粒簟。簦瑁濉。螅幔恚濉。簦簦椋恚?，ｔｈｅ　ｒａｔｅ?。铮妗。颍铮铮簟。幔睿洹。瑁濉。螅酰颍觯椋觯幔欤簟。颍幔簦濉。铮妗。簦瑁濉。颍幔睿螅穑欤簦睿簦帷。鳎澹颍濉。悖铮酰睿簦澹洌〈Xｅ?。颍澹螅酰欤螅簟。颍濉。螅幔瑁铮鳎澹洌捍Xｅ　ｒｏｏｔ?。颍幔簦濉。祝幔蟆。椋纾瑁澹螅簦琛。睢。椋恚澹洌椋帷。椋簦鳎琛。纾颍椋簦ǎ鳎瑁椋悖琛。鳎澹颍濉。颍澹螅穑澹悖簦椋觯澹欤。梗叮担担?，?。福梗矗罚ァ。梗矗畠海?、ｖｉｔｈ?。纾颍椋?，ｓｐｏｎｇｅ，ａｎｄ?。幔纾幔颍?，ａｎｄ　ｔｈｅ?。纾颍铮鳎簦琛。螅椋簦酰幔簦椋铮睢。祝幔蟆。猓澹螅?；Ｐｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｉｓｔ?。螅酰颍觯椋觯幔臁。颍幔簦濉。铮妗。瑁濉。簦簦颍幔睿螅穑欤睿簦帷。祝幔蟆。瑁椋纾瑁澹螅簦ǎ鳎瑁椋悖琛。鳎澹颍濉。颍澹螅穑澹悖簦椋觯澹欤。梗罚叮常?、９６．２５％、７８．１８％　ｇｒｉｔ，ｓｐｏｎｇｅ，ａｎｄ?。幔纾幔颍。停铮颍澹铮觯澹?，ｔｈｅｒｅ?。鳎澹颍濉。螅铮恚濉。洌澹簦幔椋欤蟆。幔妫妫澹悖簦椋睿纭。簦瑁濉。颍澹螅酰欤簦蟆。螅酰悖琛。幔蟆。簦瑁濉。欤椋瘢酰椋洹。觯铮欤酰恚?，ａｎｄ?。簦瑁濉。鳎幔。簦铩。洌澹幔臁。鳎椋簦琛。簦瑁濉。螅酰穑穑铮颍簟。恚幔簦澹颍椋幔欤螅。裕瑁濉。螅酰悖悖澹螅蟆。椋睢。簦瑁濉。颍铮铮簟。悖酰欤簦颍濉。铮妫酢。牵澹颍猓澹颍幔辏幔欤睿澹螅铮睿椋椤。椋簦鳎瑁铮酰簟。幔纾幔颉。螅瑁铮鳎蟆。簦瑁幔簟。纾颍椋簟。睿洹。螅穑铮睿纾濉。悖幔睢。猓濉。幔酰螅澹洹。椋睿螅簦澹幔洹。铮妗。幔纾幔颍桑妗。簦瑁濉。簦澹悖瑁睿椋瘢酰濉。悖幔睢。猓濉。鳎椋洌澹欤。酰螅澹洹。椋睢。簦椋螅螅酰濉。悖酰欤簦酰颍濉。铮妗。铮簦瑁澹颉。穑欤睿簦幔?，ｉｔ?。鳎椋欤臁。猓濉。纾颍澹幔簟。恚澹幔睿妫酰欤椋睿簦瑁澹妫椋澹欤洌铮妫穑欤幔睿簦螅。耍澹。鳎铮颍洌螅海牵澹颍猓澹颍幔辏幔恚澹螅铮睿椋?；ｃｕｌｔｒｅ?。酰椋簦鳎瑁铮酰簦幔纾幔?；ｇｒｉｔ；ｒｏｏｔｉｎ?。觯椋簦颍?；ｔｒａｎｓｐｌｎｔａ　植物組織培養(yǎng)是目前許多園藝植物工廠化生　產(chǎn)育苗的主要方式。它雖然可以在短時間內(nèi)實現(xiàn)大　量快速無性繁殖的生產(chǎn)目的，但仍存在著一些問題　’其中培養(yǎng)成本高，移栽成活率較低是快繁中的　兩大難題。瓊脂是固體培養(yǎng)中最好的固化劑　’，但　瓊脂占了培養(yǎng)基成本的８０％　’，是造成培養(yǎng)成本高　，脂是技術關鍵。研究人員用淺層液體培養(yǎng)或者用蛭　石．珍珠巖等無機基質(zhì)取代瓊脂的育苗方法，在葡　萄、馬鈴薯等植物的快繁中實驗，取得了良好的效　果　。　的關鍵因素。另外煉苗移栽時瓊脂清洗困難，附在　幼苗根系上未清洗干凈的瓊脂易造成根系污染，從　而影響了移栽成活率。因此如何簡化培養(yǎng)基，降低　組織培養(yǎng)的成本，改進移栽技術，提高試管苗的移　栽成活率。尋求一種廉價而操作簡便的基質(zhì)取代瓊　收稿日期：２００６—０９—２０　本實驗以菊科扶郎花屬的名貴花卉非洲菊?。ǎ牵澹颍猓澹颍幔辏幔恚澹螅铮睿椋欤樵嚥模蒙暗[和海綿作支　持物取代瓊脂，旨在探討無瓊脂基質(zhì)培養(yǎng)非洲菊無　菌生根及移栽過程的相關技術，為降低組培苗生產(chǎn)　成本．提高移栽成活率提供應用技術基礎。?。辈牧吓c方法　維普資訊 http://www.cqvip.com

第４期　王曉紅等：無瓊脂培養(yǎng)誘導非洲菊無菌生根研究　５?。保辈牧戏侵蘧掌贩N“雨燕”系列的試管增殖無菌　根系粗壯，且新產(chǎn)生的幼葉也較之海綿和瓊脂中　芽。直徑ｌｍｍ大小的砂礫，厚８ｍｍ、直徑６ｃｍ的　多，葉色蒼綠。而海綿中生根的幼苗無論從生根率　海綿塊?！∵€是從根苗質(zhì)量比較，都次于對照組。這與營養(yǎng)液?。保卜椒ā≡谏暗[與海綿基質(zhì)中與培養(yǎng)物基部全面接觸、營養(yǎng)　１．２．１培養(yǎng)基的配制　提供迅速有關。經(jīng)過煉苗移栽后統(tǒng)計的幼苗成活率　以ＭＳ為基本培養(yǎng)基，附加ＢＡ１．５ｍｇ．Ｌ一，　分析，兩種無機基質(zhì)的移栽成活率都明顯高出對照?。桑拢粒埃玻恚纾獭崽牵常啊。纾桃?，ｐＨ５．８，配制成生根　組，分別達到９７．６３％、９６．２５％。實驗過程中發(fā)現(xiàn)，　培養(yǎng)基，分裝在含有沙粒、海綿、瓊脂三種不同基　揭蓋后清洗根系時，瓊脂很難清洗干凈，用流水浸　質(zhì)的培養(yǎng)瓶中。１２１℃高壓滅菌２０ｍｉｎ?！∨輿_洗一晚后，少量細嫩的幼根很容易被沖掉或折?。保玻步臃N與煉苗移栽　斷，因此降低了幼苗的成活率，僅為７８．１８％，而　將２～３　ｃｒｎ高度的無菌叢生芽切成單芽，接種在　且清洗時較費時。相反從砂礫與海綿中取出的幼苗　已滅菌的生根培養(yǎng)基中誘導生根，統(tǒng)計三種基質(zhì)條　稍加沖洗，在多菌靈中浸泡后就可以上盆，對根系　件下的生根率及根與苗的生長狀況。２１ｄ后置于溫　影響小?！∈易匀还庹障拢]瓶煉苗一周“”，再打開瓶口煉苗　在三種基質(zhì)條件下的非洲菊無菌生根中發(fā)?。病常?，然后取出試管苗，自來水沖洗幼苗，１％的百　現(xiàn)，接種７ｄ內(nèi)已有少量生根，尤其在海綿中的生　菌清溶液浸泡１分鐘，移栽在１：１的河沙與珍珠　根啟動快。從第７ｄ后開始大幅度生根，集中生根　巖混合基質(zhì)上，塑料薄膜覆蓋保濕，２周后去掉薄　時間在第７ｄ～１４ｄ。１４ｄ以后還有少量的幼苗生根，　膜，置于室外自然光下生長。一周后統(tǒng)計移栽成活　其他已生根幼苗的主根伸出變粗，須根長出，幼苗　率。　逐漸長高。但從第１８ｄ后的生根率來看，已趨于平　以上實驗均重復３次?！》€(wěn)（圖１）?！。步Y果與分析?。玻辈煌|(zhì)對非洲菊無菌生根的影響　以瓊脂為支撐物作對照，海綿與河沙為生根?。保埃啊』|(zhì)誘導非洲菊無菌生根。統(tǒng)計生根率及根質(zhì)量?。福稀∠病∮酌缫圃猿苫盥?。結果見表１?！◎嚒。叮铩”恚被|(zhì)類型對非洲菊無菌生根的影響?。矗稀。玻啊。保础。欤浮。玻臁D１非洲菊在三種基質(zhì)中無菌生根的動態(tài)圖?。玻矤I養(yǎng)液體積對無菌苗在砂礫基質(zhì)中的生根及幼　苗生長的影響　可以看出，１８ｄ后非洲菊在三種基質(zhì)中的生根　在容量為２５０ｍｌ的培養(yǎng)瓶內(nèi)加入烘干的砂礫　率都較高，相差不大，其中以砂礫為基質(zhì)的生根率?。担埃悖怼?，然后倒入不同體積的生根營養(yǎng)液，蓋瓶滅　最高，為９６．５５％。從生根質(zhì)量來看，相對瓊脂對　菌、接種、生根、觀察生根率及幼苗生長情況，２４ｄ　照組而言，在砂礫中生根的幼苗平均生根數(shù)量多，　后的統(tǒng)計結果見下表２?！”恚矤I養(yǎng)液體積對非洲菊在砂礫中無菌生根的影響　一般認為營養(yǎng)液多，更有利與幼苗生長，因?。ㄏ罗D(zhuǎn)第８頁）　維普資訊 http://www.cqvip.com

８　河　南　林業(yè)科技　第２６卷?。矗啊。ǎ保┰谂萃┢贩N的選擇過程中，毛泡桐與其它的　圣：；０　苔　簍２【ｌ?。保啊。稀。鎴D．圈．圉．圉．圖．圖．圖．雷．　品種相比，其優(yōu)勢能夠明顯的表示出來，但是它的　劣勢也很明顯的，平均發(fā)芽時間相對比較長。所以　在栽培毛泡桐、蘭考泡桐、白花泡桐要根據(jù)需要來　懷化　杭州　西安　商丘　贛州　福州　南平　郜州　選擇不同種源泡桐種子?！D９不同種源白花泡桐種一　的?。妗昃l(fā)芽時　（２）對于毛泡桐種源濰坊的種子發(fā)芽率高，發(fā)芽　時間也不長，是栽培的理想選擇；蘭考泡桐種源選　由上圖可以看出：對于所實驗的８個種源的白　擇應該是寶雞的最為理想；白花泡桐種源選擇由我　花泡桐種子，福州種源的發(fā)芽率、發(fā)芽勢都是最高　們分析得到的結果是南平是最好的。但它們都存在　的，但是它的平均發(fā)芽時間是最長的；而南平種源　著不足，需要我們進一步加強對它們的研究，爭取　的發(fā)芽率、發(fā)芽勢僅次于福州種源，但它的平均發(fā)　培育出良好的能適宜多地域發(fā)芽、栽培的種子?！⊙繒r間卻比福州種源短的多；鄭州種源居中。福州　種源發(fā)芽較好的因素可能由于它所處的位置，當?shù)亍⒖嘉墨I：　的氣候溫度與鄭州的有相似的原因。懷化和杭州種　【ｌ】劉震，王艷梅，蔣建平．不同種源白花泡桐種子的休眠　源無論什么指標因子與其它的相比較都相對低，這　生理生態(tài)研究【Ｊ１．生態(tài)學報，２００４，２４（５）：９５９—９６４　【２】鄭蘭長，蔣小平，不同種源毛泡桐種子發(fā)芽狀況及其聚　可能鄭州所處的地理位置不適宜它們的發(fā)芽。所　類分析［Ｊ１，生物數(shù)學學報，１９９９，１４（１）：８６—８９　以，在栽培時要多因素的考慮，對于白花泡桐選擇　【３】范國強，劉玉禮，不同毛泡桐種子發(fā)芽狀況的初步研究　南平較好。?。郏剩保幽峡茖W，１９９６，１４（４）：４３９—４４ｌ　３結論?。ㄘ熑尉庉嫞焊蓤F榮）　（上接第５頁）　為無瓊脂固體培養(yǎng)誘導生根時保證足夠的培養(yǎng)液　生根中，由于新生根系扎于海綿內(nèi)，不容易拔出，　對生根具有很重要的意義。但該實驗結果顯示：生　移栽清洗有點困難，解決該問題的辦法是在海綿塊　根率與營養(yǎng)液的用量并非成正比。營養(yǎng)液為３０ｍｌ　上鋪上一層濾紙。實驗中將帶有海綿的根系清洗消　的培養(yǎng)基中幼苗生根率最高，達１００％，幼苗生長　毒完后直接轉(zhuǎn)入水培池中，由于根系仍處于液體環(huán)　情況也是最好的。原因是３０ｍｌ的營養(yǎng)液正好略高　境，很快適應而迅速生長，并且非洲菊的初花期有　于培養(yǎng)基高度，便于接種的外植體固定，并且根部　所提前?！〕浞纸轄I養(yǎng)液中，使基部的分生組織迅速萌動生　根。但應當注意營養(yǎng)液體積要適量，過多的培養(yǎng)液　參考文獻：　會使幼苗淹沒于液體中，出現(xiàn)部分材料傾斜生長、　【ｌ】楊光穗，謝振宇．非洲菊組織培養(yǎng)研究進展　熱帶農(nóng)業(yè)　葉枯黃、幼葉透明等水潰狀態(tài)而影響生長。營養(yǎng)液　科學．２００３．２３（１）：５６—６０　過少，幼苗基部組織啟動緩慢，亦影響生根速度、　【２１譚文澄，戴策剛．觀賞植物組織培養(yǎng)技術【Ｍ１．北京：中國林　生根率及幼苗的生長勢?！I(yè)出版社，１９９７．５８—６０　【３】張希太．無機基質(zhì)加簡化的ＭＳ營養(yǎng)液快繁甘薯脫毒苗?。秤懻摗　荆省浚幽下殬I(yè)技術師范學院學報．２００２，３０（３）：２４—２５　砂礫的成本低廉，取之方便，可重復使用，而　【４】鄭加協(xié)，李華東，甘勇輝．蜜寶菠蘿組織培養(yǎng)及低成本快　且實驗結果表明它更有利于非洲菊的生根與移栽。　繁技術研究［Ｊ１．果樹學報，２００５，２２（１）：２７—３０　因此用砂礫取代瓊脂作非洲菊無菌生根的固定物　【５】莊飛云，吳霞，李式軍，等．無機基質(zhì)組培快繁葡萄苗技術?。郏剩保熘参锷韺W通訊，２００１，３７（４）：２９８—２９９　不僅可行，而且具有廣闊的應用前景，對于降低大　【６】王春彥，高年春，張效平，等．非洲菊離體培養(yǎng)瓶內(nèi)誘導　批量生產(chǎn)時非洲菊的生產(chǎn)成本有重要意義。但使用　生根的研究【Ｊ】．南京農(nóng)專學報，２００３．１９（１）：１５—１９　時營養(yǎng)液的體量不容忽視，以覆蓋住砂礫的量即　【７】王曉紅，譚曉風，王義強非洲菊Ｆ１種子的無菌培養(yǎng)實　可。海綿作為一種新型的支撐材料，本人首次將其　驗…．經(jīng)濟林研究２００４．２２（２）：４２—４３　應用于非洲菊種子無菌發(fā)芽＂　，及愈傷組織、叢生?。ㄘ熑尉庉嫞贺蔽谋颍⊙康恼T導中，取得滿意的效果。該實驗將海綿用于