?國外醫(yī)藥抗生素分冊２０１４年１１月第３５卷第６期　?研究進(jìn)展?　新技術(shù)在聚酮組合生物合成中的應(yīng)用研究進(jìn)展　黃傳龍，譚樹華’，顧覺奮?。ㄖ袊幙拼髮W(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，南京２１０００９）　摘要：本文綜述了生物信息學(xué)軟件、光交聯(lián)技術(shù)、異源表達(dá)以及底盤細(xì)胞在聚酮組合生物合成中的應(yīng)用。并嘗試將其整　合為一粗略的開發(fā)思路，即“計算機虛擬設(shè)計一高通量技術(shù)篩選一（底盤細(xì)胞作宿２ａ）異源表達(dá)”。希望通過引入新技術(shù)，能進(jìn)　一步提高聚酮組合生物合成的開發(fā)效率?！￡P(guān)鍵詞：聚酮；組合生物合成；ＣｌｕｓｔＳｃａｎ；光交聯(lián)；異源表達(dá)；底盤細(xì)胞　中圖分類號：Ｒ９８　文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ　文章編號：１００１．８７５１（２０１４）０６—０２４１—０５　Ｎｅｗ?。裕澹悖瑁睿铮欤铮纾椋澹蟆。椋睢。校铮欤耄澹簦椋洌濉。遥澹悖铮恚猓椋睿幔簦铮颍椋幔臁。拢椋铮螅睿簦瑁澹螅椋蟆。龋酰幔睿纭。茫瑁酰幔睢欤铮睿纾裕幔睢。樱瑁酢瑁酰?，?。牵酢。剩酰濉妫澹睢。ǎ桑睿螅簦椋簦酰簦濉。铮妗。蹋椋妫濉。樱悖椋澹睿悖濉。幔睿洹。裕澹悖瑁睿铮欤铮纾?，Ｃｈｉｎａ?。校瑁幔颍恚幔悖澹酰簦椋悖幔臁。眨睿椋觯澹颍螅椋簦?，Ｎａｍｉｎｇ?。病。薄。埃埃埃梗。粒猓螅簦颍幔悖簦海樱澹觯澹颍幔臁。睿澹鳌。簦澹悖瑁睿铮欤铮纾椋澹螅椋睿悖欤酰洌椋睿纭。猓椋铮椋睿妫铮颍恚幔簦椋恪。螅铮妫欤鳎幔颍澹螅穑瑁铮簦铮悖颍铮螅螅欤椋睿耄椋睿?，ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ?。澹穑颍澹螅螅椋铮睢。幔睿洹。悖澹欤欤酰欤幔颉。悖瑁幔螅螅椋?，ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ?。幔穑穑欤椋悖幔簦椋铮睿蟆。椋睢。穑铮欤耄澹簦椋洌濉。颍澹悖铮恚猓椋睿幔簦铮颍椋幔臁。猓椋铮螅睿簦瑁澹螅椋?，ｗｅｒｅ　ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ?。椋睢。簦瑁椋蟆。穑幔穑澹颍祝濉。幔欤螅铩。簦颍椋澹洹。簦铩。椋睿簦澹纾颍幔簦濉。簦瑁澹螅濉。簦澹悖瑁睿铮欤铮纾椋澹蟆。椋睿簦铩。帷。睿澹鳌。颍铮酰簦濉。妫铮颉。椋恚穑颍铮觯椋睿纭。澹妫椋妫悖椋澹睿悖。铮妗。簦瑁濉。洌澹觯澹欤铮穑恚澹睿簟。铮妗。穑铮欤耄澹簦椋洌濉。颍澹悖铮恚猓椋睿幔簦铮颍椋幔臁。猓椋铮螅睿簦瑁澹螅椋螅簦瑁幔簟。椋蟆埃妫椋悖簦椋簦椋铮酰蟆。洌澹螅椋纾睢。椋睢。悖铮恚穑酰簦澹颉郑濉埃妫椋睿纭。猓。瑁椋纾琛簦瑁颍铮酰纾瑁穑酰簟。簦澹悖瑁睿铮欤铮纾椋澹螅瑁澹簦澹颍铮欤铮纾铮酰蟆。澹穑颍澹螅螅椋铮睿ǎ猓。悖澹欤欤酰欤幔颉。悖瑁幔螅螅椋螅保。耍澹。鳎铮颍洌螅海穑铮欤耄澹簦椋洌?；?。颍澹悖铮恚猓椋睿幔簦铮颍椋幔臁。猓椋铮螅睿簦瑁澹螅椋?；?。悖欤酰螅簦樱悖幔?；?。穑瑁铮簦铮悖颍铮螅螅欤椋睿耄椋睿纾唬瑁澹簦澹颍铮欤铮纾铮酰蟆。澹穑颍澹螅螅椋铮?；ｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃｈａｓｓｉｓ　聚酮是天然產(chǎn)物大家族，在醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)中有著重　三種思路如圖ｌ所示?！∫匚?，如常見的抗感染藥物大環(huán)內(nèi)酯類、免疫抑　為了排除不合理組合，科研人員開發(fā)了聚酮虛　制劑他克莫司，以及降血脂的他汀類等。而且聚酮　擬組合的軟件，引入了交聯(lián)技術(shù)來檢測聚酮合成酶　可以通過組合生物合成，得到大量新結(jié)構(gòu)的化合　ｆＰＫＳ）結(jié)構(gòu)域間的匹配性。此外，組合途徑向聚酮　物，因此具有很好的開發(fā)潛力?！‘a(chǎn)物的轉(zhuǎn)化需借助異源表達(dá)。筆者在閱讀相關(guān)文獻(xiàn)　途徑設(shè)計是組合生物合成的重要內(nèi)容，理想的　的基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)這幾種技術(shù)分別適用聚酮組合的不　方式是通過“理性設(shè)計”直接得到預(yù)期產(chǎn)物，然而　同時期，可以嘗試將其整合，粗略成為一條開發(fā)路　這目前很難。另一種思路是通過隨機組合建立化合　徑，如圖２所示：計算機虛擬組合，在設(shè)計的同時初　物庫，然后從中篩選有成藥潛力的化合物，這種方　步排除一些不合理的選項一高通量技術(shù)（如光交聯(lián)），　法雖然技術(shù)上沒有困難，但會引入很多不合理的組　對途徑進(jìn)一步篩選、驗證一異源表達(dá)，將設(shè)計出的　合，導(dǎo)致庫的質(zhì)量較低，篩選工作量很大。比較合　途徑表達(dá)出產(chǎn)物。另外隨著合成生物學(xué)的興起，底　理的方法是二者的折中，即通過一定的理性指導(dǎo)，　盤細(xì)胞有望成為未來的異源宿主?！∨懦舸蠖鄶?shù)不合理的組合，留下相對比較合理的　本文將就圖２思路展開，分別對相應(yīng)的虛擬組合　組合，再建庫篩選，可以減少工作量，提高效率。　軟件、交聯(lián)技術(shù)、異源表達(dá)、基因組精簡及底盤細(xì)　收稿日期：２０１４—０９一ｌ５　作者簡介：黃傳龍，在讀研究生，研究方向：生物學(xué)專業(yè)。?。ㄓ嵶髡撸鹤T樹華，教授，博士生導(dǎo)師，從事新藥基因工程和蛋白質(zhì)工程教學(xué)與研究。　顧覺奮，教授，研究生導(dǎo)師，從事微生物制藥教學(xué)與研究?！忉t(yī)藥抗生素分冊２０１４年１１月第３５卷第６期?。玻矗场。　　?，‘　曩　謄　慧　蓼　美驀氍囂　～　麓　囂?。欤靽獭「郏臁?；　《?。邍坦{　糕　篝?。糇住。簟《恕△咧`　篇篇拳　。　∞　纂?。臁。礻佟　掇馈。瘛”ⅰ　荒茫臁。呙啊。狻。郏茫溃溃取浚ǎ茫茫ǎ剑埃茫茫剑茫ǎ茫茫剑茫茫剑郏茫溃溃龋荩ǎ茫茫ǎ剑埃谩。郏茫溃溃取浚ǎ埃茫郏茫溃溃取浚ǎ埃茫郏茫溃溃取浚ǎ埃茫茫剑茫茫ǎ海埃。榷睢∫灰灰弧∽ⅲ海ǎ幔┦牵茫铮恚穑牵澹钌希悖幔颍簦铮铮畲翱诘慕貓D，簡單示意了雷帕霉素（黑色箭頭）與阿維菌素（灰白色箭頭）模塊間的雜交組合，　×表示進(jìn)　行組合，＝表示得出組合結(jié)果；Ｃｏ）是預(yù)測的相應(yīng)雜交產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)，￣ＳＭＩＬＥＳ格式給出；（ｃ）是使用ｃｈｅｍＡｘｏｎ顯示的產(chǎn)物結(jié)構(gòu)?！D４應(yīng)用ＣｏｍｐＧｅｎ設(shè)計聚酮雜交（以雷帕霉素與阿維菌素為例）示意＿４＿　主要在于反應(yīng)條件的改進(jìn)，從化學(xué)試劑到酶促反應(yīng)再　優(yōu)點是培養(yǎng)容易，增殖速度快，基因操作技術(shù)成熟；　到紫外光照，步驟更加簡單，檢測速率加快，尤其是　缺點是前體合成不足或者缺乏，產(chǎn)物的后修飾酶系　光交聯(lián)，符合高通量微量、快速、大規(guī)模的特點?！∪狈Α尽　?。鏈霉菌由于是聚酮的天然產(chǎn)生菌，因此具　以結(jié)構(gòu)域ＡＣＰ（酰基載體蛋白）與ＫＳ（酮合成酶）的　有較好的翻譯后修飾、前體合成酶系等，缺點是生　光交聯(lián)簡單介紹其過程［１０】：首先ＡＣＰ上的絲氨酸殘　長周期較長，基因操作比較困難，而且自身的聚酮　基與ｐＢｐａ（對苯甲酰苯丙氨酸）反應(yīng)，生成ＡＣＰ?。樱澹蛞弧『铣上到y(tǒng)可能會干擾異源聚酮（目的產(chǎn)物）的表達(dá)［１１１?！。穑拢穑?；然后將其與ＫＳ置于３６５ｎｍ紫外光下進(jìn)行交聯(lián)　異源表達(dá)的問題在于產(chǎn)量不夠理想，轉(zhuǎn)錄調(diào)　反應(yīng)，通過凝膠電泳檢驗分子量，可以判斷是否發(fā)　控、條件優(yōu)化可以在一定程度提高產(chǎn)量，如Ｓｔｅｖｅｎｓ　生交聯(lián)。圖５ｔ　。】為示意圖，圖６１１ｏ￣是Ｙｅ等的凝膠實驗　等［１２】綜述了轉(zhuǎn)錄在Ｅ．ｃｏｌｉ異源表達(dá)聚酮中的應(yīng)　結(jié)果分析?！∮?，另外他與Ｃｏｎｗａｙ等還發(fā)現(xiàn)ａｓ　因子的存在可以提?。钞愒幢磉_(dá)——途徑轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物　高某些基因的表達(dá)量，過量表達(dá)０ｓ　因子在一定程度　組合途徑轉(zhuǎn)化為聚酮產(chǎn)物需要借助異源表達(dá)?！∩峡梢蕴岣呔弁漠a(chǎn)量【＂］。但這種提高方式繁瑣而　常見的異源表達(dá)宿主有Ｅ．ｃｏｌｉ以及天藍(lán)色鏈霉菌　效果有限，而宿主性狀的優(yōu)良依然是決定產(chǎn)量的最　（Ｓ．ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ）、變鉛青鏈霉菌（Ｓ．１ｉｖｉｄａｎｓ）等。Ｅ．ｃｏｌｉ￣　基本要素。近年來隨著合成生物學(xué)的興起，構(gòu)建基?。痢。隆∫蚪M精簡的底盤細(xì)胞作為發(fā)酵工廠，逐漸成為更好　的選擇【?。矗撸欤担??！。串愒此拗髡雇蚪M精簡與底盤細(xì)胞?。粒茫校耍ぁ。樱取〉妆P細(xì)胞是合成生物學(xué)家引用汽車的術(shù)語，底?。馈。匾弧』亍”P是一輛車的基本，在此基礎(chǔ)上可以安裝其它部　注：（Ａ）同源ＡＣＰ與ＫＳ紫外光下發(fā)生交聯(lián)，而非同源的則　件，造出不同功能的車；底盤細(xì)胞與此類似，它本　不能；（Ｂ）凝膠電泳檢測分子量，判斷是否發(fā)生交聯(lián)?！∩硎且粋€精簡的細(xì)胞，通過導(dǎo)入各種生物組件（比如　圖５光交聯(lián)檢測ＡＣＰ與ＫＳ相互作用的示意圖【?。埃荨∫粭l代謝途徑中的酶１，使其具備不同的特性。?。痢。隆　蕖∧』蚪M精簡是構(gòu)建底盤細(xì)胞的途徑，即通過各　喁　【工一【工－　種基因敲除手段，逐步去掉不必要的ＤＮＡ片段，　黲?。骸?　最終得到一個無冗余的基因組?；蚪M精簡的微生　＿　物，由于其代謝負(fù)擔(dān)的減輕，通常表現(xiàn)出生長速?。埃炱荨　。粒悖穑小。椋椋椋椋椋臁。矗《瓤?、資源消耗少的特點ｒｌ５】，作為異源宿主用于發(fā)　酵，有望得到較高的產(chǎn)量和轉(zhuǎn)化率。精簡的基因組　注：ＦａｂＢ、ＦａｂＦ和ＦａｂＨ都是ＩＩ型ＫＳ，與ＡｃｐＰｆＩＩ型ＡＣＰ）親緣　關(guān)系近，可以觀察到交聯(lián)；與ＡＣＰ２（Ｉ型ＡＣＰ）?！「涌煽?，基因操作將更加精準(zhǔn)，外源基因表達(dá)受　圖６不同類型ＡＣＰ與ＫＳ交聯(lián)后的凝膠實驗結(jié)果【１０］　抑制的情況也將大大減　”】。另外，精簡的基因組?。玻矗础。祝铮颍欤洹。危铮簦澹蟆。铮睢。粒睿簦椋猓椋铮簦椋悖?，２０１４，Ｖｏ１．３５，Ｎｏ．６　穩(wěn)定性提高，有助于防止生產(chǎn)菌株退化，比如刪除?。螅椋欤椋悖铩。穑颍澹洌椋悖簦椋铮睢。铮妗。睿铮觯澹臁。悖瑁澹恚椋悖幔臁。螅簦颍酰悖簦酰颍澹螅郏剩荩危酰悖欤澹椋恪。粒悖椋洌蟆。遥澹?，２００８，３６（２１）：６８８２　［３］?。冢酰悖耄铩。?，Ｓｔａｒｃｅｖｉｃ　Ａ，Ｄｉｍｉｎｉｃ?。?，ｅｔ?。幔保疲颍铮怼。模危痢。螅澹瘢酰澹睿悖澹蟆。簦铩。悖瑁澹恚椋悖幔臁。螅簦颍酰悖簦酰颍澹蟆恚澹簦瑁铮洌蟆。妫铮颉。恚椋睿椋睿纭。恚椋悖颍铮猓椋幔臁。纾澹睿铮恚椋恪。幔睿洹。恚澹簦幔纾澹睿铮恚椋恪。洌幔簦帷。螅澹簦蟆。妫铮颉。睿澹鳌。睿幔簦酰颍幔臁×宿D(zhuǎn)座相關(guān)序列，可以使自發(fā)突變率大大降低【　】?！∧壳坝糜诨蚪M精簡的微生物包括大腸埃希　菌、枯草芽孢桿菌、阿維鏈霉菌和釀酒酵母等。比　如?。悖铮欤椤。耍保玻祝玻埃埃材昶鸾?jīng)過幾次基因組精簡，?。穑颍铮洌酰悖簦螅郏剩荩疲铮铮洹。裕澹悖瑁睿铮臁。拢椋铮簦澹悖瑁睿铮?，２０１０，４８（２）：２３４　得到一系列編號ＭＤＳ的菌株，精簡率在１?。担プ笥摇。郏薄。罚?。［４］　Ｓｔａｒｃｅｖｉｃ?。粒祝希欤妗。?，Ｄｉｍｉｎｉｃ　Ｊ，ｅｔ?。幔保遥澹悖铮恚猓椋睿幔簦铮颍椋幔臁∨c此類似的還有日本的ＭＧＦ（Ｍｉｎｉｍｕｍ?。纾澹睿铮恚濉。猓椋铮螅睿簦瑁澹螅椋蟆。铮妗。穑铮欤耄澹簦椋洌澹螅郏剩荩省。桑睿洹。停椋悖颍铮猓椋铮臁。拢椋铮簦澹悖瑁睿铮?，　２０１２，３９（３）：５０３?。妫幔悖簦铮颍┯嫞欤剩郏保罚?。Ｌｅｅ等［Ｉ８］對ＭＤＳ４２菌株進(jìn)行了蘇氨酸　發(fā)酵實驗，發(fā)現(xiàn)其發(fā)酵能力比野生菌株提高了大約?。福常ィ唬耍铮恚幔簦螅酢。梗輰Π⒕S鏈霉菌進(jìn)行精簡，也發(fā)現(xiàn)?。颍妫臁。?，ＧｒａｍａｊＯ?。龋茫停澹睿澹欤欤帷。龋牵遥澹悖铮恚猓椋睿幔睿簟。郏担荨。校澹椋幔穑穑颍铮幔悖瑁澹蟆。簦铩。欤幔颍纾濉。穑铮欤耄澹簦椋洌濉。恚铮欤澹悖酰欤澹蟆。幔蟆。穑铮簦澹睿簦椋幔臁∑浒l(fā)酵產(chǎn)量比在原產(chǎn)菌或野生阿維鏈霉菌中有明顯　的提高。由于底盤細(xì)胞的興起時間還不長，目前較　少有將其應(yīng)用到聚酮異源表達(dá)的例子，但其作為宿　主的種種優(yōu)點對于聚酮的發(fā)酵也將同樣適用，有助　于聚酮產(chǎn)量的提高。?。敌〗Y(jié)　他山之石，可以攻玉。本文簡單介紹了軟件、　光交聯(lián)技術(shù)、異源表達(dá)以及底盤細(xì)胞在聚酮組合生　物合成中的應(yīng)用，希望能借助生物信息學(xué)、高通量　技術(shù)以及合成生物學(xué)的進(jìn)展，為聚酮類組合生物合　成的開發(fā)提高效率?！」P者發(fā)現(xiàn)這幾種技術(shù)有內(nèi)在聯(lián)系，可以整合為　一條開發(fā)路徑：即先用計算機虛擬組合，快速生成　大量組合方案；然后通過高通量技術(shù)，進(jìn)一步對其　篩選、驗證；最后通過異源表達(dá)，將途徑轉(zhuǎn)化為產(chǎn)　物，并設(shè)想以精簡的底盤細(xì)胞作為異源宿主，借助　其在生長速率、轉(zhuǎn)化率等方面的優(yōu)勢，得到較高的　產(chǎn)量，為聚酮組合合成的產(chǎn)業(yè)化鋪平道路?！∵@其中，底盤細(xì)胞的研究還處于初級階段，光　交聯(lián)的高通量化也有待成熟，更多的高通量技術(shù)還　有待開發(fā)，軟件預(yù)測的準(zhǔn)確度也有待提高。希望本　文可以起到拋磚引玉的作用，希望聚酮的組合合成　走向產(chǎn)業(yè)化、為民眾健康造福的一天早日到來?！⒖嘉墨I(xiàn)?。拢欤幔椋恪。停樱簦幔颍悖澹觯椋恪。?，Ｌｉｓｆｉ?。?，ｅｔ?。幔保粒睿睿铮簦幔簦椋铮睢。铮妗。簦瑁濉。恚铮洌酰欤幔颉。穑铮欤耄澹簦椋洌濉。螅睿簦瑁幔螅濉。幔睿洹。睿铮睿颍椋猓铮螅铮恚幔臁。穑澹穑簦椋洌濉。螅睿簦瑁澹簦幔螅濉。纾澹睿濉。悖欤酰螅簦澹颍蟆。椋睢。簦瑁濉。纾澹睿铮恚濉。铮妗。樱簦颍澹穑簦铮恚悖澹蟆。簦螅酰耄酰猓幔澹睿螅椋蟆。危遥遥蹋保福矗福福郏剩荩粒穑穑臁。牛睿觯椋颍铮睢。停椋悖颍铮猓椋铮?，　２０１２，７８（２３）：８１８３?。郏玻荨。樱簦幔颍悖澹觯椋恪。粒冢酰悖耄铩。?，Ｓｉｍｕｎｋｏｖｉｃ?。?，ｅｔ　ａ１．ＣｌｕｓｔＳｃａｎ：?。幔睢。椋睿簦澹纾颍幔簦澹洹。穑颍铮纾颍幔怼。穑幔悖耄幔纾濉。妫铮颉。簦瑁濉。螅澹恚椤幔酰簦铮恚幔簦椋恪。幔睿睿铮簦幔簦椋铮睢。铮妗。恚铮洌酰欤幔颉。猓椋铮螅睿簦瑁澹簦椋恪。纾澹睿濉。悖欤酰螅簦澹颍蟆。幔睿洹。椋睢。洌颍酰纾螅郏剩荩模颍酰纭。模椋螅悖铮觥。裕铮洌幔。裕澹悖瑁睿铮?，２０１０，７（２）：１０５　［６］?。祝铮颍簦瑁椋睿纾簦铮睢。粒?，Ｒｉｖｅｒａ　Ｈ，Ｔｏｒｐｅｙ?。剩住。澹簟。幔保停澹悖瑁幔睿椋螅怼。猓幔螅澹洹。穑颍铮簦澹椋睢。悖颍铮螅蟆欤椋睿耄椋睿纭。穑颍铮猓澹蟆。簦铩。椋睿觯澹螅簦椋纾幔簦濉。悖幔颍颍椋澹颉。穑颍铮簦澹椋睢恚澹洌椋幔簦澹洹。猓椋铮螅睿簦瑁澹螅椋螅郏剩荩粒茫印。茫瑁澹恚臁。拢椋铮?，２００６，　１（１?。保海叮福贰。郏罚荨。樱悖瑁睿幔颍颉。危?，Ｋｈｏｓｌａ　Ｃ．Ｔｒａｐｐｉｎｇ?。簦颍幔睿螅椋澹睿簟。穑颍铮簦澹椋睿穑颍铮簦澹椋睢。椋睿簦澹颍幔悖簦椋铮睿蟆。椋睢。穑铮欤耄澹簦椋洌濉。猓椋铮螅睿簦瑁澹螅椋螅郏剩荩粒茫印。茫瑁澹怼。拢椋铮?，?。玻埃埃?，１（１?。保海叮罚埂。郏福荨。停澹椋澹颉。剩蹋龋幔酰螅瑁幔欤簦澹颉。遥?，Ｂｕｒｋａｒｔ?。停模痢。恚澹悖瑁幔睿椋螅怼。猓幔螅澹洹。穑颍铮簦澹椋睢。悖颍铮螅螅欤椋睿耄澹颉。妫铮颉。幔悖臁。悖幔颍颍椋澹颉。穑颍铮簦澹椋睢。洌澹瑁洌颍幔簦幔螅澹螅郏剩荩。拢椋铮铮颍纭。停澹洹。茫瑁澹怼。蹋澹簦?，２０１０，２０（１６）：４９３６?。郏梗荨。校瑁幔怼。危模校幔颍耄澹颉。遥?，Ｋｏｈｌｅｒ　ＪＪ．ＰｈＯｔＯｃｒＯｓｓｌｉｎｋｉｎｇ?。幔穑穑颍铮幔悖瑁澹蟆。簦铩。椋睿簦澹颍幔悖簦铮恚濉。恚幔穑穑椋睿纾郏剩荩茫酰颍颉。希穑椋睢。茫瑁澹怼。拢椋铮?，２０１３，１７（１）：９０?。郏保埃荨。伲濉。冢拢幔椋颉。?，Ｄｅｓａｉ?。龋澹簟。幔保痢。穑瑁铮簦铮悖颍铮螅螅欤椋睿耄椋睿纭。幔螅螅幔。妫铮颉。颍澹穑铮颍簦椋睿纭。穑颍铮簦澹椋睢。椋睿簦澹颍幔悖簦椋铮睿蟆。椋睢。穑铮欤耄澹簦椋洌濉。幔睿洹。妫欤幔簦簦。幔悖椋洹。螅睿簦瑁幔螅澹螅郏剩荩停铮臁。拢椋铮樱螅?，２０１１，７（１１）：３１５２　胡春生，吳祖澤，張慶林．聚酮類化合物異源表達(dá)研究進(jìn)　展［Ｊ］＿生物技術(shù)通訊，２０　１?。?，２４（４）：５７３　［１２］?。樱簦澹觯澹睿蟆。模?，Ｈａｆｔ?。裕?，Ｂｏｄｄｙ?。茫危裕瑁濉。颍铮欤濉。铮妗。颍簦幔睿螅悖颍椋穑簦椋铮睢。椋睢。瑁澹簦澹颍铮欤铮纾铮酰蟆。澹穑颍澹螅螅椋铮睢。铮妗。穑铮欤耄澹簦椋洌澹蟆。椋睢。猓幔悖簦澹颍椋幔臁。瑁铮螅簦螅郏剩荩。危幔簟。校颍铮洹。遥澹穑玻埃保?，３０（１１）：１３９１?。郏保常荨。樱簦澹觯澹睿蟆。模茫茫铮睿鳎幔。耍?，Ｐｅａｒｃｅ?。?，ｅｔ?。幔保粒欤簦澹颍睿幔簦椋觯濉。螅椋纾恚帷。妫幔悖簦铮颉。铮觯澹颉澹穑颍澹螅螅椋铮睢。澹睿幔猓欤澹蟆。瑁澹簦澹颍铮欤铮纾铮酰蟆。澹穑颍澹螅螅椋铮睢。铮妗。帷。簦穑濉。桑伞。穑铮欤耄澹簦椋洌濉。猓椋铮螅睿簦瑁澹簦椋恪。穑幔簦瑁鳎幔。椋睢。牛螅悖瑁澹颍椋悖瑁椋帷。悖铮欤椋郏剩荩校蹋铮印。希睿?，２０１３，８（５）：１?。郏保矗荨。停幔簦螅酰恚酰颍帷。桑拢幔悖簦澹颍椋幔臁。悖澹欤欤蟆。幔蟆。恚铮洌澹臁。妫幔悖簦铮颍椋澹螅郏剩荩粒剩希遥。玻埃保常常ǎ保粒海福薄。郏保担荨⊥鯆軏?，郭文斌，宋存江．工業(yè)微生物菌種改造的新方　法——優(yōu)勢小基因組生產(chǎn)菌的構(gòu)建［Ｊ］．微生物學(xué)報，２０１２，?。担玻ǎ常海玻福丁。郏保丁俊。眨恚澹睿瑁铮妫妫澹颉。?，Ｆｅｈ６ｒ　Ｔ，Ｂａｌｉｋ６　Ｇ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｄｕｃｅｄ?。澹觯铮欤觯幔猓椋欤椋簦。铮妗。牛螅悖瑁澹颍椋悖瑁椋帷。悖铮欤椤。停模樱矗?，ａｎ?。桑樱欤澹螅蟆。悖澹欤欤酰欤幔颉。悖瑁幔螅螅椋蟆。铮妫颉。恚铮欤澹悖酰欤幔颉。幔睿洹。螅睿簦瑁澹簦椋恪。猓椋铮欤铮纾。幔穑穑欤椋悖幔簦椋铮睿螅郏剩荩。停椋悖颍铮狻。茫澹欤臁。疲幔悖?，２０１０，９（３８）：１?。郏保贰俊。停椋铮纾酰悖瑁椤。?，Ｍｏｒｉ?。龋疲酰辏椋铩。裕牛螅悖瑁澹颍椋悖瑁椋帷。悖铮欤椤。恚椋睿椋恚酰怼。纾澹睿铮恚濉。妫幔悖簦铮颍郏剩荩拢椋铮簦澹悖瑁睿铮臁。粒穑穑臁。拢椋铮悖瑁澹恚玻埃埃?，　國外醫(yī)藥抗生素分冊２０１４年１１月第３５卷第６期?。矗叮ǎ穑簦常海薄。担贰。郏薄。福荩蹋澹濉。剩?，Ｓｕｎｇ?。拢?，Ｋｉｍ?。停?，ｅｔ?。幔保停澹簦幔猓铮欤椋恪。澹睿纾椋睿澹澹颍椋睿纭。铮妗。帷。颍澹洌酰悖澹洹纾澹睿铮恚濉。螅簦颍幔椋睢。铮妗。牛螅悖瑁澹颍椋悖瑁椋帷。悖铮欤椤。妫铮颉。獭簦瑁颍澹铮睿椋睿濉。玻矗怠。郏保梗荩耍铮恚幔簦螅酢。?，Ｕｃｈｉｙａｍａ?。?，Ｏｍｕｒａ?。?，ｅｔ?。幔保牵澹睿铮恚澹。恚椋睿椋恚椋澹洹。樱簦颍澹穑簦铮恚悖澹蟆。瑁铮螅簟。妫铮颉。簦瑁濉。瑁澹簦澹颍铮欤铮纾铮酰蟆。澹穑颍澹螅螅椋铮睢。铮妗。螅澹悖铮睿洌幔颍。恚澹簦幔猓铮欤椋螅恚郏省浚校危粒?，２０１０，?。保埃罚ǎ叮海玻叮矗丁。穑颍铮洌酰悖簦椋铮睿郏剩荩停椋悖颍铮狻。茫澹欤臁。疲幔悖簦玻埃埃?，８（２）：１　《國外醫(yī)藥抗生素分冊》投稿須知　《國外醫(yī)藥抗生素分冊》為雙月刊，是由四川抗菌素工業(yè)研究所、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所　共同主辦的國家級抗生素藥學(xué)類科技期刊，國內(nèi)外公開發(fā)行，并被國內(nèi)外主要檢索系統(tǒng)收錄?！”究貓蟮揽股厮幬锏目蒲?、生產(chǎn)和臨床應(yīng)用等方面的學(xué)科進(jìn)展，內(nèi)容包括抗生素類藥物的篩選、　合成工藝、藥物分析、藥劑學(xué)、藥理學(xué)、臨床應(yīng)用、生產(chǎn)情況、新藥介紹及新技術(shù)新設(shè)備介紹等方面。報道　形式以綜述、編譯、臨床報告、信息及文摘等為主?！。蓖陡逡蠹白⒁馐马棥。保币裕牛恚幔椋旆绞桨l(fā)送文章電子文稿，并郵寄審稿費５Ｏ元?！。保卜餐吨帘究寮?，２月內(nèi)向作者反饋處理意見，未收到處理意見者可通過電子郵件或電話詢問。經(jīng)審　閱后需修改的稿件退回作者修改，若修改期超過２個月即作為新稿處理。?。参母宓淖珜懸蟆。玻蔽念}：題名應(yīng)簡明、切題，論文、綜述和研究簡報應(yīng)同時提供中、英文題名，文題中不宜出現(xiàn)化學(xué)　式及不為人們熟悉的縮寫。中文題目一般不超過２０個字?！。玻舱菏且蕴峁┪恼聝?nèi)容梗概為目的，不加評論和補充解釋，簡明、確切地記述文獻(xiàn)重要內(nèi)容的短　文。摘要應(yīng)具有性和自明性，并且擁有與文獻(xiàn)同等量的主要信息，即不閱讀全文，就能獲得必要　的信息。盡量避免使用特殊符號、公式，切忌把應(yīng)在引言中出現(xiàn)的內(nèi)容寫入摘要，３００字左右為宜?！。玻酬P(guān)鍵詞：選擇能反映論文特征內(nèi)容、通用性較強的術(shù)語３～８個為關(guān)鍵詞，中、英文關(guān)鍵詞排列應(yīng)一致?！。玻凑模簯?yīng)盡量減少層次，一般不宜超過３層?！。玻祬⒖嘉墨I(xiàn)：必須以作者親自閱讀過的近期公開文獻(xiàn)為限，力求精選?！。澄母遄珜懸蟮难a充說明?。常本C述：綜述文章需選題新穎，層次清晰，應(yīng)結(jié)合文獻(xiàn)扼要評述國內(nèi)外學(xué)者在該領(lǐng)域的研究進(jìn)展，不要　泛泛羅列文獻(xiàn)；文章要述評結(jié)合，不可只述不評；述要有深度和廣度，既要全面，又要有側(cè)重點；　評既要客觀公正，又要有獨到見解。文章全部字?jǐn)?shù)一般不應(yīng)超過８０００字?！。常才R床報告：圍繞抗生素應(yīng)用，密切結(jié)合臨床，反映藥物治療過程中產(chǎn)生的問題，并提供預(yù)防和解決方　法，可包括特定藥物、疾病和藥學(xué)服務(wù)模式等。可以是研究報告、特殊個案報道等，個案報道也可以　以一個藥或一類藥積累較多例數(shù)后作深入探討。?。常尘幾g：圍繞某一專題，綜合編譯幾篇或節(jié)譯一篇外文文獻(xiàn)的主要內(nèi)容。字?jǐn)?shù)一般在５０００字以內(nèi)，譯文　均以編寫名義發(fā)表，且不注明出處，但來稿時請附原文復(fù)印件。作者簡介請注明工作單位?！。常次恼阂阅苷f明原文的基本內(nèi)容和觀點為原則，字?jǐn)?shù)一般以８００￣１０００字為宜，請附原文復(fù)印件?！?