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ELISA、RPR、TRUST、TPPA四種方法檢測梅毒螺旋體抗體的價值

來源:九壹網(wǎng)
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ELISA、RPR、TRUST、TPPA四種方法檢測梅毒螺旋體抗體的價

目的:探討ELISA、RPR、TRUST、TPPA四種方法檢測梅毒螺旋體抗體的價值。方法:收集本院確診為梅毒患者的血清標(biāo)本,共計400份。同時選擇朱診斷為梅毒的人群400例作為對照。將上述400份梅毒標(biāo)本隨機(jī)分為4份,分別接受ELISA、RPR、TRUST、TPPA檢測。分析ELISA、RPR、TRUST、TPPA四種方法陽性檢出情況及假陽性檢出情況。結(jié)果:TPPA陽性檢出率及假陽性檢出率明顯優(yōu)于RPR、TRUST、TPPA三種檢測方法。結(jié)論:本文作者認(rèn)為TPPA操作繁瑣,依賴人工,但是診斷特異性和敏感性高,RPR可以作為梅毒診斷的初篩試驗,但是易受梅毒之外疾病的影響。ELISA自動化程度高,減少人為操作的影響,對梅毒早期輔助診斷較好。TRUST有助于判斷梅毒再感染及復(fù)發(fā)。

標(biāo)簽:ELISA;RPR;TRUST;TPPA

梅毒為常見的性傳播疾病,傳染力強(qiáng),危害性大,已經(jīng)成為危害公共安全的疾病。2010~2011年梅毒發(fā)病率分別為:15.6/10萬、17.5/10萬,美國2010年發(fā)現(xiàn)梅毒發(fā)病率僅為0.2/10萬,可見我國梅毒疾病防控形式不容樂觀。梅毒檢測不可避免存在假陽性和假陰性現(xiàn)象,如何選擇靈敏度高、特意性強(qiáng)的指標(biāo)成為本次研究的重點。因此本文作者對2010年1月至2017年2月本院采集的梅毒血清樣本,分析ELISA、RPR、TRUST、TPPA四種方法的檢測價值。

1資料與方法

1.1資料

收集2010年1月至2017年2月本院確診為梅毒患者的血清標(biāo)本,共計400份,樣本來源為男性202例,女性198例,年齡17~62歲,平均年齡(38.51±15.24)歲。同時選擇未診斷為梅毒的人群400例作為對照。將上述400份梅毒標(biāo)本隨機(jī)分為4份,分別接受ELISA、RPR、TRUST、TPPA檢測。

1.2儀器

全自動加樣器、離心機(jī)、全自動酶聯(lián)免疫分析儀、振蕩器、背光式讀片燈等。

1.3測定方法

1.3.1TPPA檢測 待測血清和TPPA混合,用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒與血清中的梅毒螺旋體抗體結(jié)合,產(chǎn)生肉眼可見的凝集反應(yīng)。

1.3.2ELISA檢測 純化的梅毒螺旋體的重組蛋白為抗原以包被固相板條,加梅毒血清和辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗人體IgG抗體。

1.3.3RPR檢測 RPR抗原懸液一滴加入待測血清中,用RPR旋轉(zhuǎn)儀水平轉(zhuǎn)動紙卡8分鐘,判斷結(jié)果。

1.3.4TRUST檢測 紙卡中置入TRUST試劑和待測血清,10分鐘后進(jìn)行觀察。

1.4觀察指標(biāo)

分析ELISA、RPR、TRUST、TPPA四種方法陽性檢出情況及假陽性檢出情況。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 17.0軟件,計數(shù)資料行x2檢驗,P<0.05為差異有意義。

2結(jié)果

TPPA陽性檢出率及假陽性檢出率明顯優(yōu)于RPR、TRUST、TPPA三種檢測方法,比較有差異(P<0.05)。見表1。

3討論

梅毒螺旋體分為先天性和獲得性兩種。前者主要通過母嬰傳播,后者主要通過性接觸、接吻、手術(shù)等。梅毒感染后,機(jī)體產(chǎn)生抗梅毒螺旋體抗體和反應(yīng)素。抗梅毒螺旋體抗體可分為Ig6和IgM,前者可終生存在,后者出現(xiàn)后可預(yù)防短期再次感染,具有保護(hù)作用。梅毒感染后,抗梅毒螺旋體抗體出現(xiàn)時間比反應(yīng)素早。

通過本次研究,本文作者發(fā)現(xiàn)TPPA的陽性檢出率、假陽性檢出率明顯優(yōu)于ELISA、RPR、TRUST三種檢測方法。也有學(xué)者指出TPPA法對判斷梅毒復(fù)發(fā)、胎兒感染梅毒具有很高的特異性。還有學(xué)者指出TPPA法對判斷梅毒復(fù)發(fā)、胎兒感染梅毒、梅毒再感染都有較好的臨床意義。但是TP-PA缺點是操作復(fù)雜,耗時間長,試劑價格較貴,需人工判斷,不利于血站、血液樣本量大的臨床醫(yī)院開展。

ELISA是依照梅毒螺旋體基因工程抗原研制的血清學(xué)檢測方法。檢測自動化程度高,樣本需要量少,不受外界環(huán)境穩(wěn)定、機(jī)體疾病、溶血等影響,適用大批量血液樣本檢測,結(jié)果便于電腦保存。但是ELISA試驗也存在一定假陽性率和假陰性率,有學(xué)者收集300例性病門診患者標(biāo)本,以TPPA為對照,發(fā)現(xiàn)ELISA假陽性率和假陰性率分別為1%和4%。

RPR為非特異性的梅毒血清學(xué)試驗,檢測特異性差,體內(nèi)存在SLE、RA、水痘等疾病,或者妊娠患者也會產(chǎn)生假陽性,因此RPR只能用作篩選試驗。但RPR的滴度可作為判斷疾病活動情況的指標(biāo)。此外RPR對診斷Ⅰ期梅毒的陽性率達(dá)到80%以上。但是RPR對潛伏期梅毒檢出率僅僅為1.6%~4.9%。

TRUST為非特異性梅毒篩選試驗,有較高假陽性和假陰性結(jié)果。有學(xué)者指出TRUST檢測結(jié)果容易受到自身免疫性疾病影響。有學(xué)者對200例70歲以上老年人群中進(jìn)行TRUST檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn)1%會出現(xiàn)假陽性。但是TRUST滴度可以有助于判斷梅毒再感染及復(fù)發(fā)。

因此本文作者認(rèn)為TPPA操作繁瑣,依賴人工,但是診斷特異性和敏感性高,RPR可以作為梅毒診斷的初篩試驗,但是易受梅毒之外疾病的影響。ELISA自動化程度高,減少人為操作的影響,對梅毒早期輔助診斷較好。TRUST有助于判斷梅毒再感染及復(fù)發(fā)。

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