專利名稱：斑馬魚notch3基因突變體的制備方法專利類型：發(fā)明專利

發(fā)明人：張慶華,岳倩文,季策,徐行,張秋月,李偉明申請(qǐng)?zhí)枺篊N201810525963.1申請(qǐng)日：20180528公開號(hào)：CN108753833A公開日：20181106

摘要：本發(fā)明公開了涉及一種斑馬魚notch3基因突變體的制備方法；包括如下步驟：確定notch3基因敲除的靶點(diǎn)位置；以pUC19?gRNA scaffold質(zhì)粒為模板，使用引物T7?notch3?sfd、tracr rev進(jìn)行PCR擴(kuò)增；對(duì)PCR產(chǎn)物純化、體外轉(zhuǎn)錄獲得gRNA；將gRNA與Cas9蛋白導(dǎo)入斑馬魚胚胎一細(xì)胞期中，培養(yǎng)獲得穩(wěn)定遺傳的notch3基因突變體。本發(fā)明利用CRISPR/Cas9技術(shù)，通過選擇獨(dú)特的一段打靶區(qū)，使得斑馬魚中的notch3基因被敲除，又不“誤傷”其他基因，形成Notch3敲除的斑馬魚；另外，本發(fā)明還公開了notch3基因缺失斑馬魚突變體的表型，對(duì)于研究Notch信號(hào)通路意義重大。

申請(qǐng)人：上海海洋大學(xué)

地址：201306 上海市浦東新區(qū)滬城環(huán)路999號(hào)

國籍：CN

代理機(jī)構(gòu)：上海伯瑞杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司

代理人：曹莉

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