專利名稱：斑馬魚notch2基因突變體的制備方法專利類型：發(fā)明專利
發(fā)明人：張慶華,岳倩文,徐行,季策,李偉明申請?zhí)枺篊N201810526041.2申請日：20180528公開號：CN108707628A公開日：20181026
摘要：本發(fā)明公開了涉及一種斑馬魚notch2基因突變體的制備方法；包括如下步驟：確定notch2基因敲除的靶點位置；以pUC19?gRNA scaffold質(zhì)粒為模板，使用引物T7?notch2?sfd、tracr rev進行PCR擴增；對PCR產(chǎn)物純化、體外轉(zhuǎn)錄獲得gRNA；將gRNA與Cas9蛋白顯微注射入斑馬魚胚胎一細胞期中，篩選獲得穩(wěn)定遺傳的notch2基因突變體。本發(fā)明利用CRISPR/Cas9技術(shù)，通過選擇獨特的一段打靶區(qū)，使得斑馬魚中的notch2基因被敲除，又不“誤傷”其他基因，形成Notch2敲除的斑馬魚，為后續(xù)基因功能的深入研究提供了實驗材料，對于研究Notch信號通路意義重大。
申請人：上海海洋大學
地址：201306 上海市浦東新區(qū)滬城環(huán)路999號
國籍：CN
代理機構(gòu)：上海伯瑞杰知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
代理人：曹莉
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