1.目的及原理

呼吸作用是果蔬采收后的重要生理活動，是影響貯運(yùn)效果的重要因素。測定呼吸強(qiáng)度可衡量呼吸作用強(qiáng)弱，了解果蔬采后生理狀態(tài)，為低溫和氣調(diào)貯運(yùn)及呼吸熱計(jì)算提供必要數(shù)據(jù)。

呼吸強(qiáng)度的測定通常是采用定量堿液吸收果蔬在一定時(shí)間內(nèi)呼吸所釋放出來的CO2，再用酸滴定剩余的堿，即可計(jì)算出呼吸所釋放出的CO2量，求出呼吸強(qiáng)度，其單位為每公斤每小時(shí)釋放出CO2毫克數(shù)。反應(yīng)如下： 2NaOH + CO2 → Na2CO3 + H2O Na2CO3 + BaCl2 → BaCO2 ↓+ 2NaCl 2NaOH + H2C2O4 → Na2C2O4 + 2H2O

測定可分為氣流法和靜置法兩種。氣流法設(shè)備較復(fù)雜，結(jié)果準(zhǔn)確。靜置法簡便，但準(zhǔn)確性較差。本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)和掌握測定方法。 2 材料試劑及儀器

蘋果，梨，柑桔，蕃茄，黃瓜，青菜等。

鈉石灰，20%氫氧化鈉，0.4 mol/L氫氧化鈉，0.1 mol/L草酸，飽和氯化鋇溶液，酚酞指示劑，正丁醇，凡士林。

真空干燥器，大氣采樣器，吸收管，滴定管架，鐵夾，25ml滴定管，15ml三角瓶，500ml燒杯，φ8cm培養(yǎng)皿，小漏斗，10ml移液管，洗耳球，100ml容量瓶，萬用試紙，臺稱。 3.操作方法 3.1 氣流法

氣流法的特點(diǎn)是果蔬處在氣流暢通的環(huán)境中進(jìn)行呼吸，比較接近自然狀態(tài)，因此，可以在恒定的條件下進(jìn)行較長時(shí)間的多次連續(xù)測定。測定時(shí)使不含CO2的氣流通過果蔬呼吸室，將果蔬呼吸時(shí)釋放的CO2帶入吸收管，被管中定量的堿液所吸收，經(jīng)一定時(shí)間的吸收后，取出堿液，用酸滴定，由堿量差值計(jì)算出CO2量。

（1）按圖（暫不串接吸收管）連接好大氣采樣器，同時(shí)檢查不使有漏氣，開動大氣采樣器中的空氣泵，如果在裝有20% NaOH溶液的凈化瓶中有連續(xù)不斷的氣泡產(chǎn)生，說明整個(gè)系統(tǒng)氣密性良好，否則應(yīng)檢查各接口是否漏氣。

（2）用臺稱稱取果蔬材料1公斤，放入呼吸室，先將呼吸室與安全瓶連接，撥動開關(guān)，將空氣流量調(diào)在0.4升/分，將定時(shí)鐘旋鈕按反時(shí)針方向轉(zhuǎn)到30分鐘處，先使呼吸室抽空平衡半小時(shí)，然后連接吸收管開始正式測定。

（3）空白滴定用移液管吸取0.4 mol/L的NaOH 10 ml，放入1支吸收管中，加一滴正丁醇，稍加搖動后再將其中堿液毫無損失地移到三角瓶中，用煮沸過的蒸餾水沖洗五次，直至顯中性為止。加少量飽和BaCl2溶液和酚酞指示劑二滴，然后用0.1 mol/L H2C2O4（草酸）滴定至粉紅色消失即為終點(diǎn)。記下滴定量，重復(fù)一次，取其平均值，即為空白滴定量（V1）。如果兩次滴定相差超過0.1 ml，必須重新滴定一次，同時(shí)取一支吸收管裝好同量堿液和一滴正丁醇，放在大氣采樣器的管架上備用。

（4）當(dāng)呼吸室抽空半小時(shí)后，立即接上吸收管，把定時(shí)針重新轉(zhuǎn)到30分鐘處，調(diào)整流量保持0.4升/分。待樣品測定半小時(shí)后，取下吸收管，將堿液移入三角瓶中，加飽和BaCl2 5 ml和酚酞指示劑二滴，用草酸滴定，操作同空白滴定，記下滴定量（V2）。 計(jì)算公式：

呼吸強(qiáng)度（CO2 mg / kg·h）= ( V1 – V2 )·M ·44 / ( W · h ) M—H2C2O4摩爾濃度（mol / L） w—樣品重量（kg）； h—測定時(shí)間（小時(shí)）； 44—CO2的毫摩爾。 3.2 靜置法

靜置法比較簡便，不需特殊設(shè)備。測定時(shí)將樣品置于干燥器中，干燥器底部放入定量堿液，果蔬呼吸釋放出的CO2自然下沉而被堿吸收，靜置一定時(shí)間后取出堿液，用酸滴定，求出樣品的呼吸強(qiáng)度。

用移液管吸取0.4 mol/L的NaOH 20 ml放入培養(yǎng)皿中，將培養(yǎng)皿放進(jìn)呼吸室，放置隔板，裝入1公斤果蔬，封蓋，測定1小時(shí)后取出培養(yǎng)皿把堿液移入燒杯中（沖洗4—5次），加飽和BaCl2 5 ml，酚酞2滴，用0.1 mol/L草酸滴定，用同樣方法做空白滴定。計(jì)算同氣流法。 4 記錄與計(jì)算 列出計(jì)算式并計(jì)算結(jié)果 5. 思考題

呼吸在果實(shí)成熟衰老中的作用是什么？